Papaïne
La papaïne est une protéase à cystéine à large spectre. Elle catalyse le clivage des liaisons peptidiques. C’est une enzyme thermophile avec une activité maximale entre 60 et 70 °C.
La papaïne est extraite du latex de la papaye. Une des méthodes de purification consiste à cristalliser la protéine avec un ajout d'éthanol.
Comment utiliser la papaïne en laboratoire ?
La papaïne est utilisée à une concentration stock de 10 mg/ml. Les temps d'incubations fluctuent de quelques minutes à quelques heures selon les applications. L'enzyme étant thermophile, il est possible d'augmenter son action en augmentant la température.
La papïne est courement utilisée :
- pour l'extraction ADN, l'incubation peut durer 1H à 65 °C vu que l'ADN n'est pas sensible à la température. La protéase est utilisée pour accélérée la lyse cellulaire et dégrader les histones liées à l'ADN.
- Pour une lyse cellulaire, le temps d'incubation est plus court pour ne pas dégrader les protéines intracellulaire.
- pour l'hydrolyse d'anticorps ou de protéines dans le cas d'étude structurale.